Metoda pierwsza tworzenia profilu DNA RFLP lub długości fragmentów restrykcyjnych wielopostaciowość. RFLP nie jest używany tak często dziś, ponieważ wymaga dużej próbki DNA - aż 25 włoskami lub niklu wielkości miejscu płynu ustrojowego - i może trwać nawet miesiąc, aby zakończyć [Źródło: Badenia]. Wymaga to również badanie wielu odcinków nici DNA znalezienia wariantów, co jest czasochłonne i pozostawia więcej miejsca na błąd człowieka. Niektóre etapy analizy RFLP są również stosowane w innych typach profilu DNA. Dla RFLP, kroki są: Największa
- Oddzielne komórki biały i czerwony krwi z wirówki. Największa
- Extract DNA z jąder białych krwinek. Dokonuje się tego poprzez przemywanie komórek w gorącej wodzie, a następnie dodanie soli, i wprowadzenie mieszaniny z powrotem do wirówki [Źródło: University of Arizona]. Największa
- Cięcie na fragmenty nici DNA za pomocą enzymu restrykcyjnego. Największa
- Place fragmentów w jeden koniec złoże żelu agarozowym z elektrodami w nim. Agarozy żel jest wykonany z agar-agar, rodzaju wodorostów morskich, który włącza się, gdy żelatyna rozpuszcza się we wrzącej wodzie. Największa
- Za pomocą prądu elektrycznego, aby posortować segmenty DNA o długości. Proces ten nazywa się elektroforezę w żelu agarozowym. Elektroforeza odnosi się do procesu przesuwania ujemnie naładowanych cząsteczek przez żel za pomocą energii elektrycznej. Krótsze odcinki odsuń się od ich pierwotnej lokalizacji, przy dłuższych zatrzymać się bliżej. Segmenty układać w równoległych rzędach. Największa
- Użyj arkusza nitrocelulozy lub nylonu, aby zmyć DNA. Arkusz jest barwione tak różne długości zespołów DNA są widoczne gołym okiem. Przez działanie na arkusz z promieniowaniem, powstaje autoradiografii. Jest to obraz na kliszy rentgenowskiej pozostawionych przez wzór rozkładu promieniowania. Autoradiogram, z jego charakterystycznych ciemnych kolorach równoległych pasm, jest profil DNA.
PCR (reakcja łańcuchowa polimerazy) analiza jest zwykle pierwszym krokiem do stworzenia profilu DNA dzisiaj. PCR może replikować małe ilości DNA w celu utworzenia większej liczby próbek do analizy. Czyni to za pomocą powtarzający się proces, który trwa około pięciu minut. Po pierwsze, DNA polimerazy termostabilne - specj